1．滅菌溫度應(yīng)是一個(gè)溫度范圍，而不是一個(gè)固定值，通常，培養(yǎng)基使用說(shuō)明上滅菌溫度是一個(gè)固定值，如：121℃，20min，其實(shí)121℃只是滅菌溫度的下限，實(shí)際的滅菌溫度在121℃～124℃（或123℃）之間波動(dòng)。如果是自動(dòng)控溫型滅菌鍋，設(shè)定好滅菌溫度下限為121℃后，當(dāng)溫度升到124℃（或123℃）時(shí)，自動(dòng)斷電停止加熱，當(dāng)溫度降到121℃時(shí)，自動(dòng)開(kāi)始加熱；如果是手動(dòng)控溫型滅菌鍋，當(dāng)溫度升到124℃時(shí)，手動(dòng)切斷電源停止加熱，當(dāng)溫度降到121℃時(shí)，手動(dòng)接通電源開(kāi)始加熱。
2．不同類(lèi)型高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)排放冷空氣的不同要求
1.非自動(dòng)控溫型滅菌鍋（手提式滅菌鍋）
對(duì)于這類(lèi)滅菌鍋必須排盡冷空氣，如果不排盡冷空氣，冷空氣熱膨脹后對(duì)壓力鍋的工作壓力有影響，造成壓力和溫度不能一一對(duì)應(yīng)，顯示的溫度比鍋內(nèi)的實(shí)際工作溫度高，滅菌鍋的工作溫度不能達(dá)到設(shè)定的殺菌溫度，會(huì)影響滅菌效果。
2.自動(dòng)控溫型滅菌鍋

自動(dòng)控溫型滅菌鍋通過(guò)熱敏電極監(jiān)測(cè)鍋內(nèi)溫度變化，顯示屏上顯示的溫度是鍋內(nèi)真實(shí)的工作溫度，在冷空氣沒(méi)有排盡的情況下，也能夠保證滅菌的溫度要求。由于飽和水蒸汽的滅菌效果.好，所以在使用自動(dòng)控溫型滅菌鍋時(shí)，也應(yīng)該排放冷空氣，提高滅菌效果。

3.不同類(lèi)型高壓蒸汽滅菌鍋初次使用的安全檢查
1.非自動(dòng)控溫型滅菌鍋
①手動(dòng)打開(kāi)安全閥，看安全閥是否正常；
②加熱升溫過(guò)程中，看壓力表指針的上升狀況是否有受阻情況發(fā)生，沒(méi)有受阻，可正常使用。
2.自動(dòng)控溫型滅菌鍋
①手動(dòng)打開(kāi)安全閥，看安全閥是否正常；
②加水時(shí)，觀察水位指示燈是否正常顯示水位狀況；
③在排除冷空氣的前提下， 觀察顯示屏上的溫度和壓力表指示溫度的差，通常情況下，壓力表上的溫度略高于顯示屏上的溫度，此壓力差如果不超過(guò)3℃，可正常使用。
4.影響滅菌效果的3個(gè)因素
1.水
水溫應(yīng)盡量低。溫度不超過(guò)15℃。水的硬度值在0.7～2.0mmoL /L之間。
2.蒸汽的干燥程度
滅菌鍋應(yīng)使用干燥程度不小于0.9的飽和蒸汽，即蒸汽含水量不超過(guò)10%，金屬負(fù)載狀態(tài)下，干燥程度不小于0.95，以保持溫度與壓力符合線性關(guān)系。
3.滅菌時(shí)間
滅菌時(shí)間是指滅菌過(guò)程中滅菌室內(nèi)達(dá)到規(guī)定溫度后滅菌所需時(shí)間。操作中，應(yīng)注意觀察蒸汽的進(jìn)汽速度和壓力, 一般保持壓力和溫度同步上升。
5.液態(tài)物質(zhì)滅菌要注意卸壓不能過(guò)快
在對(duì)液態(tài)物質(zhì)進(jìn)行滅菌時(shí)，當(dāng)滅菌結(jié)束注意卸壓不能過(guò)快，盡量將排氣閥關(guān)小，保持自然降壓，保持系統(tǒng)原有的平衡，以防產(chǎn)生液體減少或噴濺現(xiàn)象。提醒：高壓滅菌鍋屬于高壓設(shè)備，操作人員需在當(dāng)?shù)靥胤N設(shè)備監(jiān)督部門(mén)考核取證。壓力閥也要定期送專(zhuān)業(yè)部門(mén)檢驗(yàn)。平日按照設(shè)備作業(yè)指導(dǎo)書(shū)規(guī)定要求使用和維護(hù)保養(yǎng)并做好記錄。